结核分枝杆菌Rv3872基因的克隆、表达和纯化

• 作者: 丁元生 刘忠华 毕爱笑 胡忠义
• 来源期刊: 中华临床医师杂志（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 分枝杆菌,结核 克隆,分子 基因表达 纯化
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 79-85
• 页数: 7页
• 分类号: R3
• 字数: 3308字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0785.2008.01.015

摘要

目的 原核表达并纯化结核分枝杆菌Rv3872蛋白.方法 聚合酶链反应(PCR)技术从结核分枝杆菌标准株H37Rv全基因组中扩增出的表达Rv3872基因序列,将其克隆到pMD18-T载体后,测序分析.亚克隆该目的 基因到pET28a表达载体,最终转化至大肠杆菌BL21(DE3),获得正确的阳性克隆子后大量表达重组Rv3872蛋白,再经纯化、定量后,通过Western blot分析其抗原性.结果 扩增Rv3872基因经序列测定与GenBank公布的序列完全一致,表达蛋白经SDS-PAGE分析,在约15 000 kD处有表达条带,纯化后的重组蛋白占总蛋白的90%以上.免疫印迹分析显示重组的Rv3872蛋白具有抗原性.结论 成功表达结核分枝杆菌的Rv3872蛋白,为结核病血清学诊断候选抗原筛选和开发应用打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡忠义		7	64	4.0	7.0
2	丁元生		2	7	2.0	2.0