介导人血红素加氧酶-1基因真核表达质粒的构建及鉴定

• 作者: 李慧敏 缪珩 苏建华 蒋秀芹 鲁一兵
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 血红素加氧酶-1 真核表达质粒 基因重组
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: R758.63
• 字数: 2793字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2008.01.012

摘要

目的:构建含人血红素加氧酶-1(HO-1)基因的重组pcDNA3.1质粒并进行鉴定.方法:利用分子生物学技术,从人肝脏标本中提取出RNA,进行RT-PCR后,做TA克隆,成功获得pMD/19-HO-1质粒,采用限制性内切酶BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ从pMD/19-HO-1质粒中将目的基因片段切出,克隆到质粒pcDNA3.1的相应酶切位点中,构建重组质粒pcDNA3.1-HO-1,采用限制性酶切、DNA测序鉴定,将构建好的质粒瞬时转染ECV304细胞株,Western blot测定HO-1表达.结果:酶切、测序鉴定证实插入位点及方向与预期完全一致,测序证实hHO-1与Gene Bank提供的原始序列完全一致,瞬时转染细胞后HO-1蛋白表达明显增高.结论:成功构建了含人血红素加氧酶-1基因的真核表达质粒,为进一步研究该基因在糖尿病血管并发症中的作用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲁一兵	南京医科大学第二附属医院内分泌科	58	231	7.0	13.0
2	缪珩	南京医科大学第二附属医院内分泌科	96	422	11.0	16.0
3	李慧敏	南京医科大学第二附属医院内分泌科	27	133	5.0	10.0
4	苏建华	南京医科大学第二附属医院内分泌科	8	15	3.0	3.0
5	蒋秀芹	南京医科大学第二附属医院内分泌科	1	1	1.0	1.0