PTHrP基因靶向RNA干扰重组表达质粒的构建鉴定以及在HTB-94细胞中的功能检测

• 作者: 沙广钊 秦宏敏 韩会峰
• 来源期刊: 中国骨与关节损伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: siRNA(PTHrp)质粒构建 RNA干扰 PTHrp蛋白和mRNA表达
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 564-566
• 页数: 3页
• 分类号: R6
• 字数: 2998字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-9935.2008.07.012

摘要

目的 构建针对目的 基因PTHrp的pSileneer3.1-Hl neo siRNA(small interfering RNA)表达质粒,并在人体软骨肉瘤细胞HTB-94中观察其干扰效果.方法 设计并合成针对PTHrP基因编码区的含有发卡结构的互补的寡核苷酸链,体外退火后克隆入经B amH I, HindⅢ双酶切线性化的干扰载体pSilencerTM 3.1H1 neo中,对重组质粒进行酶切分析和DNA系列测定.结果 双酶切证实PTHrP siRNA表达质粒克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致,同时干扰了PTHrP基因的mRNA和蛋白的表达.结论 成功构建的靶向RNA干扰重组表达质粒,可以通过小RNA序列干扰靶向基因的mRNA转录,降低靶向基因在细胞中mRNA和蛋白的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦宏敏	徐州医学院附属医院创伤骨科	28	95	6.0	8.0
2	韩会峰	徐州医学院附属医院创伤骨科	10	21	3.0	4.0
3	沙广钊		4	7	1.0	2.0