构建的FIt3L胞外域原核表达载体在大肠杆菌中的表达

• 作者: 何贤辉 卢宏松 徐丽慧 施焕敬 韩捷
• 来源期刊: 暨南大学学报(自然科学与医学版)
• 学科: 工学
• 关键词: FMS样酪氨酸激酶3配体 胞外域 原核表达 组氨酸标签
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 331-335
• 页数: 5页
• 分类号: TP206|O329|TP274
• 字数: 3479字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2008.04.001

摘要

目的:构建含组氨酸标签的FMS样酪氨酸激酶3配体(Fms-like tyrosine kinase 3 ligand,FIt3L)胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行表达.方法:依据FIt3L基因序列设计引物,以RT-PCR的方法从小鼠脾脏总RNA中克隆FIt3L基因并构建其胞外域原核表达载体,测序鉴定后在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达,用免疫印迹鉴定.结果:克隆到FIt3L编码区全长序列,经DNA测序证明与已报道的序列相同;构建羧基端带有His6标签的FIt3L胞外域蛋白的原核表达载体,转化大肠杆菌后SDS-PAGE分析显示在BL21(ED3)中获得较高表达;免疫印迹分析表明IPTG诱导后表达的FIt3L胞外域蛋白的相对分子质量(Mr)为19 000,与理论值相符,此蛋白与抗His6标签的抗体发生特异性反应.结论:成功克隆FIt3L基因,构建其胞外域蛋白的原核表达载体,并在大肠杆菌中获得表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐丽慧	暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所	69	509	13.0	20.0
2	何贤辉	暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心	98	770	16.0	23.0
3	卢宏松	暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心	5	7	1.0	2.0
4	施焕敬	暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心	5	7	1.0	2.0
5	韩捷	暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心	3	2	1.0	1.0