不同拷贝数及间隔肽序列对毕赤酵母分泌表达EXA的影响

• 作者: 储炬 庄英萍 张嗣良 王晖 钱江潮
• 来源期刊: 华东理工大学学报（自然科学版）
• 关键词: 间隔肽 exendin-4类似物 多拷贝串联 毕赤酵母 分泌表达
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 40-46
• 页数: 7页
• 字数: 3822字
• 语种: 中文

摘要

通过多拷贝串联表达,以及在分泌信号序列和目的蛋白N端之间插入几个氨基酸的间隔短肽,以提高exendin-4类似物串联体EXA在重组毕赤酵母中的分泌表达水平.实验结果表明:2～5个EXA串联插入均比单个EXA插入有利于提高表达水平,而4拷贝EXA串联体的表达产物较多滞留在胞内.在EXA的N端增加间隔肽可促进蛋白分泌,与不含间隔肽序列的4拷贝EXA串联表达载体相比,含有糖基化位点(NTTEEGEPK)和肠激酶识别位点(DDDDK)间隔肽的插入,使蛋白表达水平分别提高了4倍和9倍.