荧光定量PCR法检测重组毕赤酵母工程菌的外源基因拷贝数

• 作者: 何云凤 范开 郭晋霞
• 来源期刊: 重庆理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 荧光定量PCR 表达 胰岛素前体 基因拷贝数
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 药学与医学
• 页码范围: 77-83
• 页数: 7页
• 分类号: Q39
• 字数: 2819字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8425(z).2016.02.014

摘要

提出了重组毕赤酵母工程菌pPICZ-DT30/GS115基因组中外源基因DT30拷贝数的实时荧光定量PCR方法.该重组工程菌用来表达人胰岛素前体(PI-DT30),其表达量的高低、菌种稳定性对工艺研究及整体项目成本等有重大影响.外源基因拷贝数是检测表达量的一个重要指标.该方法中,利用毕赤酵母的看家基因GAP(Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)为内参,分别建立含GAP基因和DT30基因的双标准曲线.将工程菌基因组进行荧光定量PCR,根据标准曲线和Ct值计算目的基因DT30在重组毕赤酵母工程菌中的拷贝数,结果为7个.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何云凤	重庆理工大学药学与生物工程学院	2	4	1.0	2.0
2	郭晋霞	重庆理工大学药学与生物工程学院	3	6	2.0	2.0
3	范开		15	56	4.0	7.0