产酶溶杆菌OH11菌株几丁质酶基因的克隆与表达

• 作者: 刘凤权 朱慧 王云霞 胡白石
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 产酶溶杆菌OH11菌株 chiA基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: S432.42
• 字数: 3298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2008.01.010

摘要

利用PCR方法从产酶溶杆菌OH11菌株中克隆到编码几丁质酶的chiA基因.同源性比较发现,其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的ChiA有97%以上的序列一致性.基因经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)上构建重组质粒pChiA,并转化宿主菌BL21(AI)产生BLChiA表达菌株.经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后发现,BLChiA菌株产生相对分子质量约为75×103的蛋白质.生物活性试验表明,该蛋白能水解几丁质,在几丁质培养基上产生一透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用.因此该蛋白具有一定的生物防治作用.