PI3-K/Akt shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

• 作者: 任琎 张艳 王迎伟 赵聃 邱文 高玲娟
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: P13-K/Akt shRNA 肾小球系膜细胞(GMCs)
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 407-411
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4368.2008.04.001

摘要

目的:构建针对P13-K/Akt基因的特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体.方法:用DNA重组技术将针对大P13-K/Akt基因不同位点所设计的8个shRNA序列克隆到真核表达质粒pGenesil-1中.在酶切分析及序列测定后,用脂质体染至大鼠肾小球系膜细胞(GMCs).Western blot检测蛋白的相对表达量来筛选最佳沉默效率的shRNA.结果:限制性酶切及酸序列分析证明重组质粒正确.Western blot证实在重组质粒中shPik3c3-2、shAktl-4具有最佳沉默效率.结论:成功构建了PK/Akt shRNA的真核表达质粒.该实验结果为进一步研究P13-K/Akt信号通路的生物学功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王迎伟	南京医科大学微生物与免疫学系	49	239	9.0	14.0
2	张艳	南京医科大学微生物与免疫学系	41	186	8.0	12.0
3	邱文	南京医科大学微生物与免疫学系	26	30	3.0	5.0
4	高玲娟	南京医科大学微生物与免疫学系	12	52	3.0	7.0
5	赵聃	南京医科大学微生物与免疫学系	21	11	2.0	3.0
6	任琎	南京医科大学微生物与免疫学系	3	1	1.0	1.0