分泌型Survivin真核表达载体的构建及其在HeLa细胞中的表达

• 作者: 何贤辉 卢宏松 徐丽慧 施焕敬 韩捷
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 存活索 真核准表达 分泌型 肿瘤相关抗原
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 562-566,577
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4029字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2008.06.007

摘要

目的:构建含6个组氨酸标签(His6)的小鼠存活素(Survivin)融台蛋白的真核表达载体,及其在真核细胞中的表达.方法:根据小鼠Surivin序列设计引物,经过RT-PCR克隆5urvivin的Cdna并进一步构建分泌型Sar-vivin的真核表达载体,经测序鉴定后在大肠杆菌中扩增在HeLa细胞中表达;以金属离子螯合层析富集,再用免疫印迹法鉴定.结果:克隆到Surivin编码区全长序列,经DNA测序后证明与已报道序列相同.构建氨基端融合小鼠IL-2信号肽,羧基端带有His6标签的Survivin融合蛋白的真棱表达载体,在HeLa细胞中转染成功并且表达;细胞上清经HisTmp HP柱层析富集后,进行免疫印迹分析,表明该融合蛋白以分泌型方式在HeLa细胞中表达.结论:成功克隆Survivin的Cdna,并构建其分泌型真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐丽慧	暨南大学生命科学技术学院生物工程研究所	69	509	13.0	20.0
2	何贤辉	暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心	98	770	16.0	23.0
3	卢宏松	暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心	5	7	1.0	2.0
4	施焕敬	暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心	5	7	1.0	2.0
5	韩捷	暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心	3	2	1.0	1.0