小鼠HMGB1启动子红色荧光蛋白报告基因载体的构建及在真核细胞中的表达

• 作者: JIANG Yong YANG Li 刘铮 徐佳 王娟 邓鹏 黄劭
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 高迁移率族蛋白B1 启动子 红色荧光蛋白 报告基因
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 767-770
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2992字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2008.08.003

摘要

目的 构建小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)启动子驱动的红色荧光蛋白报告基因载体,为研究细胞内HMGB1的基因表达调控和相关的信号转导机制提供重要工具.方法 采用基因重组技术构建含HMGB1启动子区的红色荧光蛋白报告基因载体pDsRed1-1-HMGB1p;脂质体法瞬时转染NIH3T3细胞.观察HMGB1启动子存正常情况下以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激后的细胞内活性.结果 酶切鉴定和DNA测序证明所构建的红色荧光蛋白报告基凼载体正确:该载体在NIH3T3细胞内静息状态呈低水平表达,经TNF-α刺激后,观察到表达高亮度红色荧光的细胞明显增多.结论所构建的HMGB1启动子红色荧光蛋白报告基因载体正确,具有正常启动蛋白表达的活性,可有效用于HMGB1基因表达信号调控机制的研究.