c-Jun氨基末端激酶1反义真核表达载体及其蛋白缺陷细胞株的构建与鉴定

• 作者: 何晓庆 刘起展 周建伟 尹仕伟 彭雷 徐辉 李爱萍 王国强 陈瑞
• 来源期刊: 中华劳动卫生职业病杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: JNK1 遗传载体 质粒 反义 转染
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 538-541
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 字数: 3112字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2008.09.008

摘要

目的 构建反义JNK1荧光真核细胞表达载体,建立JNK1蛋白缺陷人胚肺成纤维细胞(HELF)株.方法 用Trizol试剂抽提HELF细胞中总RNA,以反转录PCR扩增JNK1目的 片断,双酶切,纯化PCR产物后,反向插入pEGFP-C1绿色荧光质粒,构建反义pEGFP-C1-asJNK1真核表达载体;大量抽提质粒并转染至HELF细胞中.24 h后使用G418筛选,挑选单克隆细胞扩大培养,经荧光显微成像和蛋白免疫印迹鉴定.结果 pEGFP-C1-asJNK1表达载体DNA测序结果与预期目的 片断序列一致,且JNK1蛋白表达水平明显抑制.结论 反义pEGFP-C1-asJNK1真核表达载体构建成功,JNK1蛋白质缺陷HELF细胞株成功建立.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王国强	南京医科大学卫生毒理学系	15	147	6.0	12.0
2	周建伟	南京医科大学卫生毒理学系	96	765	15.0	22.0
3	李爱萍	南京医科大学卫生毒理学系	23	209	8.0	14.0
4	刘起展	南京医科大学卫生毒理学系	29	205	8.0	13.0
5	徐辉	南京医科大学卫生毒理学系	40	167	7.0	11.0
6	陈瑞	南京医科大学卫生毒理学系	4	4	2.0	2.0
7	何晓庆		8	65	4.0	8.0
8	尹仕伟	南京医科大学卫生毒理学系	1	0	0.0	0.0
9	彭雷	南京医科大学卫生毒理学系	1	0	0.0	0.0