丙型肝炎病毒C端截短21个氨基酸NS5B蛋白的克隆、表达及鉴定

• 作者: 吕敏 李越希 杨华凤 潘明洁
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 非结构区5B蛋白 RNA依赖的RNA聚合酶 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 86-89
• 页数: 4页
• 分类号: Q7
• 字数: 2794字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2008.02.002

摘要

构建HCU C端截短21个氨基酸的.NS5B(HCV NS5B-C21)的重组原核表达质粒,并获得HCVNS5B-C21蛋白,为以其为靶位的抗HCV药物筛选等创造条件.利用PCR技术扩增HCVNS5B-C21基因,BamHⅠ和Xho Ⅰ双酶酶切后连接到经同样酶酶切的原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,获得阳性重组质粒pET-28a(+)-NSSB-C21,IFTG诱导表达,亲和层析法纯化目的蛋白表达产物经SDS-PAGE进行鉴定.成功构建了HCV NSSB蛋白表达载体pET-28a(+)-NS5B-C21,经诱导明显表达出6His-NS5B-C21,截短形式的6His-NS5D-C21表达产物的可溶性明显增加.HCV NS5B-C21蛋白在体外得到了有效表达,表达的蛋白主要存在于上清液中,纯化获得了NS5B-C21蛋白,为抗HCV药物筛选等奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李越希		49	295	9.0	14.0
2	吕敏	南京医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系	3	11	2.0	3.0
3	潘明洁		5	13	2.0	3.0
4	杨华凤	南京医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系	4	16	2.0	4.0