细粒棘球绦虫转基因植物载体重组pBI-Eg95质粒构建及鉴定

• 作者: 周辉 李文桂
• 来源期刊: 中国地方病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球绦虫 植物.基因修饰 质粒
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 401-404
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 4649字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-4955.2008.04.014

摘要

目的 构建并鉴定细粒棘球绦虫(Eg)转基因植物载体重组pBI-Eg95质粒.方法 从细粒棘球蚴包囊中分离原头节.经超声粉碎后抽提总RNA,反转录成eDNA,设计合成引物,以eDNA为模板.通过PCR从cDNA中扩增出目的 基因Eg95,经电泳及测序鉴定后,将该基因定向克隆到植物表达载体pBI121中构建pBI-Eg95重组质粒,电穿孔转化根癌农杆菌(At)LBA4404株;从转化的At阳性株中抽提质粒进行双酶切和以抽提的质粒为模板进行PCR鉴定.结果 RT-PCR扩增出1条约471 bp的特异性条带,DNA序列分析与GenBank知的序列同源性为100%.从转化的At中抽提的质粒,双酶切及PCR测定的结果与预期相符.结论 成功构建了细粒棘球绦虫转基因植物载体重组pBI-Eg95质粒,为进一步构建细粒棘球绦虫转基因植物疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李文桂	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	313	1230	16.0	20.0
2	周辉	重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所	30	90	5.0	8.0