人CDK4基因的原核表达及重组蛋白的纯化和复性

• 作者: 冯晶 曹玉华 李桂英 王琪 许晶晶 郝东云 陈勇
• 来源期刊: 吉林大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 人CDK4 原核表达 包涵体 融合蛋白 亲和纯化
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 992-996
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 2970字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-5489.2008.05.039

摘要

将人CDK4基因克隆入原核表达载体pET28a(+)中, 经酶切和测序鉴定正确的重组质粒pET28a-CDK4, 转化E.coli BL21(DE3)后获得表达菌株. 该表达菌株经IPTG诱导后, 高效表达出带有组氨酸标签的以包涵体形式存在的融合蛋白, 表达量占菌体总蛋白的52.6%, 包涵体经过洗涤、尿素变性溶解、 His Trap HP Kit柱纯化、稀释复性, 获得纯度达98%以上的蛋白. SDS-PAGE及Western blot分析表明, 在分子量34 000处有一特异性蛋白条带. 结果表明, 已成功的表达和纯化纯度达98%的重组人CDK4蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯晶	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	10	118	5.0	10.0
2	郝东云	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	10	50	4.0	7.0
3	陈勇	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	29	169	7.0	12.0
4	王琪	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	19	49	3.0	6.0
5	曹玉华	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	4	8	2.0	2.0
6	许晶晶	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0