人肝癌细胞系HepG2中survivin-3鉴定及其真核载体构建

• 作者: 徐兵 杨来华
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: SVV 真核表达载体 HepG2
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1075-1077
• 页数: 3页
• 分类号: Q279|R735.7
• 字数: 2001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-6273.2008.06.022

摘要

目的:鉴定肝癌细胞系HepG2中survivin异构体(survivin variant,SVV variant)并构建其真核表达栽体.方法:提取HepG2细胞总RNA,根据Gen-Bank内survivin 3个异构体核苷酸序列设计3条引物对其进行鉴定;设计含有BamH I和Xho I双酶切位点的SVV-3引物,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增SVV-3完整编码区,扩增产物用BamHI和XhoI双酶切后定向克隆到真核细胞表达栽体pcDNA3.1中,序列测定进行鉴定.结果:HepG2细胞表达SVV-3、1,SVV-3表达尤为丰富.对SVV-3克隆测序,与Gen-Bank报道完全一致.结论:成功鉴定出HepG2表达SVV-3、1,构建了SVV-3真核表达载体.