幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因的克隆及其高效表达

• 作者: 宣俊文 朱卫华 李生迪 陈翠萍
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 771-773
• 页数: 3页
• 分类号: R378|Q785|Q786
• 字数: 2365字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2008.09.011

摘要

目的 克隆幽门螺杆菌尿素酶B亚单位(UreB)基因,构建原核表达载体,并进行高效表达.方法 以幽门螺杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增UreB基因,双酶切后,与质粒pET-22b(+)连接,构建表达载体pET-22b(+)/UreB,分别转化E. coli BL21(DE3)、Origami(DE3)和Rossetta(DE3),经IPTG诱导后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 经酶切及测序,证明幽门螺杆菌UreB基因的原核表达载体构建正确.3种重组菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析,均可见相对分子质量为64000的目的 蛋白条带,Rossetta(DE3)重组菌目的 蛋白表达量最高,约占菌体蛋白的35%.Western blot结果表明,表达的目的 蛋白具有良好的反应原性.结论 已成功克隆了幽门螺杆菌UreB基因,并在大肠杆菌Rosssetta(DE3)中获得了高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈翠萍	中国药品生物制品检定所诊断室	6	14	1.0	3.0
2	宣俊文	兰州生物制品研究所第一研究室	12	7	1.0	2.0
3	李生迪	兰州生物制品研究所第一研究室	5	8	2.0	2.0
4	朱卫华	兰州生物制品研究所第一研究室	2	2	1.0	1.0