Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α的构建和表达鉴定

• 作者: 关剑 张万广 徐宗全 李高鹏 王其 陈孝平
• 来源期刊: 中国普外基础与临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 胰腺移植 免疫耐受 移植嵌合体
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 基础与实验研究
• 页码范围: 887-891
• 页数: 5页
• 分类号: R735.7|R730.231
• 字数: 3316字
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆和构建携带人低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α.方法 以缺氧的肝癌细胞株HepG2总RNA为模板,进行RT-巢式PCR,获得HIF-1α的cDNA,克隆入Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE2hyg,酶切重组子鉴定.将构建好的PTRE-HIF-1α用脂质体法转入HepG2Tet-on细胞,在强力霉素的作用下,用RT-PCR及Western blot法鉴定重组质粒的表达.结果 扩增出HIF-1α的cDNA测序结果 与Genbank记载完全一致,并成功克隆入PTRE2hyg ,将反应质粒PTRE-HIF-1α转入HepG2Tet-on细胞,可以完整有效表达HIF-1α且受强力霉素的调控.结论 成功克隆和构建携带HIF-1α基因的Tet-on基因表达系统反应质粒PTRE-HIF-1α,并证明其表达能在HepG2Tet-on细胞中受强力霉素调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈孝平	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心	414	2912	23.0	34.0
2	关剑	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心	10	92	5.0	9.0
3	张万广	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心	75	482	12.0	17.0
4	徐宗全	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心	4	28	2.0	4.0
5	李高鹏	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心	5	45	3.0	5.0
6	王其	华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心	9	39	3.0	6.0