猪细小病毒SC-1株VP2基因的定点突变及其对该基因表达的影响

• 作者: 徐志文 朱玲 王印 王小玉 胡秋炅 蒋清蓉 郭万柱
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 VP2基因 定点突变 真核表达
• 年，卷（期）: 2008,（7）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 563-568
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.2|Q786
• 字数: 5057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.07.004

摘要

根据GenBank中的猪细小病毒(PPV)VP2基因序列设计并合成了2对突变引物,对PPV SC-1株VP2基因进行了定点突变.利用重叠延伸PCR技术分别将VP2蛋白中第402位(A)和214位(B)的半胱氨酸突变为精氨酸,并定向克隆入真核表达载体pPI-2.EGFP中,构建含报告基因EGFP的重组质粒pPI-2.EGFP.VP2(A)、pPI-2.EGFP.VP2(B);利用脂质体介导法将上述重组质粒转染COS-7细胞,从而研究该突变对VP2基因表达的影响.结果显示,成功构建了合突变体及EGFP的真核表达载体;在倒置荧光显微镜下,突变后的质粒转染呈现不同的荧光信号,A样品的荧光呈颗粒状分布于细胞中,而B样品与阳性对照相似,荧光信号均匀分布于细胞中.提示,突变的引入是导致表达差异的主要原因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱玲	四川农业大学动物生物技术中心	151	499	13.0	17.0
2	郭万柱	四川农业大学动物生物技术中心	166	1465	21.0	28.0
3	徐志文	四川农业大学动物生物技术中心	184	909	15.0	20.0
4	胡秋炅	四川农业大学动物生物技术中心	3	4	1.0	2.0
5	蒋清蓉	四川农业大学动物生物技术中心	4	13	3.0	3.0
6	王印	四川农业大学动物生物技术中心	104	558	13.0	18.0
7	王小玉	四川农业大学动物生物技术中心	41	312	9.0	15.0