hBMP-7基因重组腺相关病毒载体的构建及人牙髓细胞转染的研究

• 作者: 厉强 李昂 石建峰 饶国洲
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 转染 细胞 牙髓 基因重排 骨形态发生蛋白质类
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 临床研究
• 页码范围: 73-75,79
• 页数: 4页
• 分类号: R78
• 字数: 2933字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2008.01.027

摘要

目的:构建人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因重组腺相关病毒载体,并转染牙髓细胞,为牙组织损伤修复的基因治疗做探索性研究.方法:以含hBMP-7全长cDNA的载体PTcDNA-hBMP-7为模板进行PCR扩增,将回收产物和pAAVIRES-hrGFP分别双酶切后连接、转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,获得重组质粒pAAVIRES-hrGFP-hBMP-7.采用磷酸钙共沉淀法转染293细胞进行病毒包装,收获的病毒液按氯仿处理、PEG/NaCl沉淀、酚:氯仿反复抽提法浓缩纯化,斑点杂交法测病毒滴度,并转染体外培养的牙髓细胞.结果:酶切鉴定和测序结果表明,hBMP-7基因成功克隆入pAAVIRES-hrGFP载体中.在293细胞中包装出重组腺相关病毒载体rAAVIRES-hBMP-7,物理滴度为3.0×1011 v.g/ml.rAAV转染牙髓细胞后GFP表达逐渐增强,可持续表达到4周以后.结论:重组腺相关病毒载体rAAVIRES-hBMP-7,能有效转染牙髓细胞表达目的基因.可用于牙组织工程基因治疗的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昂		81	451	12.0	17.0
2	石建峰		28	97	6.0	7.0
3	饶国洲		64	326	9.0	14.0
4	厉强	西安交通大学医学院第二附属医院	1	2	1.0	1.0