真核表达重组小鼠IL-15/Fc融合蛋白的制备和活性鉴定

• 作者: 冯云 孔祥丽 张平 李小玉 李燕 陈思秀
• 来源期刊: 华西药学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白细胞介素15/Fc融合蛋白 真核表达 白细胞介素15 CD8+T细胞
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 639-642
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 4014字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-0103.2008.06.005

摘要

目的 制备真核表达小鼠白细胞介素15(IL-15)和IgGγ1 Fc段融合蛋白,并探讨其对抗原特异性CD8+T细胞的作用.方法 运用RT-PCR方法,从B6小鼠脾细胞中分离小鼠IL-15和IgG γ1绞链区-CH2-CH3 Fc cDNA.在IL-15 3'端和Fc 5'端引入BamH I酶切位点,将IL-15和Fc直接连接,构建小鼠IL-15/Fe融合蛋白基因,再连接到真核表达质粒载体pcDNA3.1(a+)上,转化CHO-S细胞表达、纯化后,研究其活性.结果 融合蛋白486 bp的编码由162个氨基酸组成,其中含48个信号肽氨基酸的小鼠IL-15前体蛋白和由681 bp编码227个氨基酸的IgGγ1-CH2-CH3功能区构成;表达蛋白在IL-15信号肽引导下能高效分泌到培养液中,有二聚体和三聚体两种天然结构,单体分子量约50 kDa,能特异性的结合IL-15R并抑制抗原诱导的CD8+T细胞的增殖反应.结论 成功构建了小鼠IL-15/Fc融合蛋白真核表达载体,并在CHO-S细胞中得到高效表达.此融合蛋白具有较高的生物学活性,可有效地抑制抗原特异性CD8+细胞的增殖反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯云	四川大学口腔疾病研究国家重点实验室	57	195	8.0	11.0
2	李燕	四川大学口腔疾病研究国家重点实验室	68	253	9.0	13.0
3	张平	四川大学口腔疾病研究国家重点实验室	139	919	16.0	24.0
4	李小玉	四川大学口腔疾病研究国家重点实验室	46	317	12.0	16.0
5	陈思秀	四川大学口腔疾病研究国家重点实验室	10	68	4.0	8.0
6	孔祥丽	四川大学口腔疾病研究国家重点实验室	10	64	5.0	8.0