真核荧光蛋白表达载体 pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1的构建与表达

• 作者: 张巧 杨胜利 艾敏 赵国强
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: B7.2 MAGE-1 真核表达载体 肿瘤免疫
• 年，卷（期）: 2008,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 943-947
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 3608字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2008.05.028

摘要

目的:构建表达B7.2和MAGE-1的绿色荧光共表达载体pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1,并在真核细胞中表达.方法:根据GenBank中的序列,对B7.2、MAGE-1各设计一对两端带有特定限制性酶切位点的引物,分别从乳腺组织、乳癌组织提取总RNA,进行RT-PCR后,将两扩增产物分别克隆在pGEM-T载体,经测序证实碱基序列无误后,双酶切pGEM-T载体,回收目的片段,将两目的片段亚克隆至真核绿色荧光蛋白共表达载体(pEGFP-C3)上,并转染真核细胞,观察其在真核细胞中表达.结果及结论:pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体经酶切及基因序列分析验证,PCR扩增片段与选择的目的片段序列相符,pEGFP-C3-B7.2-MAGE-1真核表达载体构建成功.该表达载体转染EC9706细胞后,用免疫荧光显微镜观察和RT-PCR分析,该重组载体能够在真核细胞中广泛表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张巧	郑州大学公共卫生学院卫生毒理学教研室	45	147	7.0	9.0
2	赵国强	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0
3	杨胜利	郑州大学基础医学院食管癌研究室	33	134	7.0	10.0
4	艾敏	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	2	1	1.0	1.0