HTLV-1 Tax 基因真核表达载体的构建及对 RPE 细胞的影响

• 作者: 吴开力 崔冬梅 梁静文 聂玉红 邓江云
• 来源期刊: 眼科新进展
• 学科: 医学
• 关键词: 人T淋巴细胞白血病病毒-1 Tax 基因 Tax蛋白 视网膜色素上皮细胞
• 年，卷（期）: 2008,（12）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 881-885
• 页数: 5页
• 分类号: R774.1
• 字数: 4797字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人 T 淋巴细胞白血病病毒-1(human T-cell leukemia virus type 1,HTLV-1)Tax 基因真核表达载体,在人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞表达 Tax 蛋白,观察其对细胞的影响.方法 应用基因重组技术构建重组载体 PIRES2ECFP-Tax(PT),鉴定后将重组载体转染入 RPE 细胞,应用 RT-PCR、Western-blot 和免疫荧光法检测细胞内 Tax 基因和蛋白的表达;通过 MTT 和流式细胞仪检测质粒(空白载体、PT 和 Green-Tax)转染 RPE 细胞 24 h 和 48 h 后对 RPE 细胞生长活力及细胞周期的影响.结果 经双酶切鉴定和测序分析证实成功地构建了 HTLV-1 Tax 真核表达载体;通过 RTPCR、Western-blot 和免疫荧光法检测到转染 Tax 重组载体的 RPE 细胞中有 Tax 基因和蛋白的表达.质粒转染 RPE 细胞后,细胞生长活力受到抑制,G1 期减少而 S 期增加.但转染 Tax 质粒和空白栽体,对 RPE 细胞的生长活力和细胞周期产生相似影响.结论 成功构建了 HTLV-1 Tax 基因真核表达载体,并在 RPE 细胞中表达 Tax 蛋白;Tax 质粒对 RPE细胞的影响不排除是转染试剂所致.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓江云	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	5	5	1.0	2.0
2	聂玉红	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	6	7	1.0	2.0
3	崔冬梅	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	10	10	1.0	3.0
4	梁静文	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	3	1	1.0	1.0
5	吴开力	中山大学中山眼科中心眼科学国家重点实验室	44	110	6.0	8.0