pCMV-tag2B-HBX质粒的构建和表达

• 作者: 王郁杰
• 来源期刊: 内科
• 学科: 医学
• 关键词: 重组质粒 乙型肝炎病毒X基因 构建 表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 326-328
• 分类号: R575.1
• 字数: 2734字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-7768.2008.03.002

摘要

目的 构建乙型肝炎病毒X基因(HBX)的真核表达质粒,诱导并鉴定其表达.方法 将克隆获得的HBX全长cDNA片段插入带有报告基因的真核表达质粒pCMV-tag2B,构建HBX的重组表达载体pCMV-tag2B-HBX,经DNA测序证明HBX的cDNA片段的插入方向和其全长cDNA的碱基顺序,将重组质粒转染HepG2细胞系,诱导其表达,用Western Blot进行鉴定.结果 构建的重组表达载体pCMV-tag2B-HBX经双酶切表明有相应大小的DNA片断,序列分析证实为正确的有完整读码框的X基因,用脂质体转染法可将pCMV-tag2B-HBX导入HepG2细胞并成功表达,目的 蛋白经Western Blot鉴定具有生物学活性.结论 成功构建了HBX真核表达质粒pCMV-tag2B-HBX,重组质粒能表达具有生物学活性的HBX蛋白,为研究HBX的功能打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王郁杰	河南省郑州市第五人民医院消化科	5	7	2.0	2.0