抗HBsAg人源抗体Fab片段原核表达的优化

• 作者: 史智扬 周镇先 崔仑标 曾晓燕 汪华 焦永军 薛蓉 龚希萍
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 抗HBsAg人源抗体 hFabHB1 原核表达 优化
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 147-149
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3786字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2008.02.015

摘要

目的:优化抗HBsAg人源抗体片段hFabHB1在大肠杆菌中功能性表达的条件.方法:通过测定宿主菌培养物A600值观察10 g/L的葡萄糖对宿主菌生长的影响;比较诱导前是否更换培养液的2种不同条件hFabHB1的表达产量;比较在37℃和25℃ 2种诱导温度下功能性hFabHB1分子的表达量以及Fd和轻链表达的平衡性.大量表达的功能性hFabHB1分子经亲和层析纯化后,用ELISA鉴定其生物活性.结果:在培养液中加入10 g/L的葡萄糖可有效抑制重组蛋白的本底表达,增加宿主菌的生长速度;在加入IPTG诱导前更换培养液可明显提高hFabHB1的表达产量;25℃的诱导温度比37℃能表达更多的功能性Fab分子,并且Fd和轻链表达量也更趋于平衡.经亲和层析纯化的hFabHB1分子可与HBsAg特异性结合.结论:实验结果为在原核系统中大量表达该抗体片段提供了技术储备.