人TCA-12-2/TCB-7.1真核双表达载体的构建与表达

• 作者: 张巨峰 张文峰 牟艳芳 王俊伟 邵红伟 黄树林
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 受体 抗原 T细胞 载体构建 基因表达
• 年，卷（期）: 2008,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 527-531
• 页数: 5页
• 分类号: RQ78|Q813
• 字数: 3566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2008.03.025

摘要

目的:将T细胞抗原受体基因TCA-12-2和TCB-7.1共同构建在真核表达载体pDC315,用于哺乳动物细胞293转染研究.方法:将分离得到的淋巴细胞总RNA反转录合成cDNA,以此为模板进行PCR扩增得到TCA-12-2基因;以实验室保存含TCB-7.1基因的质粒为模板,扩增得到TCB-7.1基因.随后酶切,连入载体pIRES2-AcGFP1,通过亚克隆连入载体pDC315,得到重组质粒pDC315-TCA-12-2-TCB-7.1.重组体质粒经酶切鉴定后,并对插入的TCA-12-2和TCB-7.1基因片段进行测序,将鉴定好的阳性重组质粒用脂质体介导转染293细胞,并通过RT-PCR和流式细胞仪检测TCA-12-2和TCB-7.1基因的表达情况.结果:TCA-12-2和TCB-7.1可以同时构建在载体pDC315上,RT-PCR和流式细胞仪检测发现TCA-12-2和TCB-7.1基因可以成功在293细胞上表达.结论:成功构建了含TCA-12-2和TCB-7.1基因的双表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄树林	广东药学院生命科学与生物制药学院生物制药研究所	84	302	8.0	11.0
2	邵红伟	广东药学院生命科学与生物制药学院生物制药研究所	34	126	6.0	9.0
3	张巨峰	广东药学院生命科学与生物制药学院生物制药研究所	11	29	3.0	5.0
4	王俊伟	广东药学院生命科学与生物制药学院生物制药研究所	3	5	2.0	2.0
5	张文峰	广东药学院生命科学与生物制药学院生物制药研究所	14	22	2.0	3.0
6	牟艳芳	广东药学院生命科学与生物制药学院生物制药研究所	5	7	2.0	2.0