人源肺腺癌噬菌体抗体库的构建及初步筛选

• 作者: 庞华 李少林 罗弋
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 噬菌体抗体库 单链抗体 肺腺癌 筛选
• 年，卷（期）: 2008,（22）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2082-2085
• 页数: 4页
• 分类号: R392.13|R73-35|R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.22.007

摘要

目的 构建人源肺腺癌噬菌体单链抗体库,并筛选肺腺癌细胞A549特异性单链抗体.方法 利用肺腺癌患者癌旁淋巴结组织构建肺腺癌噬菌体单链抗体库.从该抗体库中筛选特异性识别A549细胞的单链抗体,将阳性克隆菌转化E.coli HB2151进行可溶性表达.抗体亲和层析纯化后经SDS-PAGE、Western blot鉴定,通过ELISA法鉴定其与人肺腺癌细胞结合的特异性.结果 成功构建了1个4.6×107 的噬菌体抗体库.在筛选过程中,肺腺癌噬菌体单链抗体得到富集,收获率逐轮得到提高,第5轮为第1轮的181倍.在E.coli HB 2151中实现了单链抗体的可溶性表达.SDS-PAGE与Western blot结果显示抗体相对分子质量为30×103左右.细胞ELISA测定结果显示可溶性抗体具有较高的特异性,能与A549细胞结合,而不与MDA-MB-435细胞结合.结论 从肺腺癌病人癌肿周围淋巴结扩增免疫球蛋白基因成功地构建人源肺腺癌噬菌体单链抗体库,并从中筛选到肺腺癌特异性抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李少林	重庆医科大学核医学教研室	232	1134	14.0	22.0
2	庞华	重庆医科大学附属第一医院核医学科	53	201	7.0	11.0
3	罗弋	重庆医科大学核医学教研室	19	69	4.0	6.0