survivin蛋白的原核高效、可溶性表达及其抗体在恶性肿瘤早期诊断中的应用

• 作者: 吴素香 孔路科 郭建巍 马骢 魏杰 黎卫平
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 生存素 生存素抗体 酶联免疫吸附实验 重组融合蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1641-1643
• 页数: 3页
• 分类号: R341|R446|R730.43
• 字数: 3171字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2008.17.016

摘要

目的 实现重组survivin在大肠杆菌中的高效、可溶性表达,检测健康人和肿瘤患者血清中anti-survivin并探讨其在肿瘤早期诊断中的应用价值.方法 重组PET32a-survivin质粒转化BL21感受态细胞,IPTG诱导表达8 h后对表达产物行溶菌酶处理、冻融及超声处理,SDS-PAGE及Western blot鉴定后用镍离子金属螯合层析柱纯化.建立基于重组融合蛋白的survivin特异性抗体的检测方法,对300份健康血清、144份肿瘤血清anti-survivin进行了检测,并将anti-sur-vivin与肝癌、肠癌、胰腺癌、卵巢癌患者中AFP、CEA、CA199、CA125等肿瘤标志物进行了联合分析.结果 重组survivin融合蛋白在BL21中获得了高效、可溶性表达,表达量约占菌体总蛋白的30%.建立了检测survivin抗体的间接ELISA方法,anti-survivin在不同的肿瘤血清中均有表达,阳性率各不相同.结论 成功的实现了survivin蛋白在大肠杆菌中的高效、可溶性表达;结果提示在肿瘤的辅助诊断中,anti-survivin与现有的肿瘤标志物CA199、CEA、CA-199和CA-125联合检测,可以互相补充其不足,提高肿瘤的诊断率.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭建巍	海军总医院检验科	56	244	9.0	12.0
2	马骢	海军总医院检验科	98	534	12.0	17.0
3	黎卫平	兰州大学医学院病理学教研室	26	101	6.0	7.0
4	孔路科	兰州大学医学院病理学教研室	2	1	1.0	1.0
5	魏杰	兰州大学医学院病理学教研室	2	1	1.0	1.0
6	吴素香	兰州大学医学院病理学教研室	3	3	1.0	1.0