人血管生成素1真核表达载体的构建及测序

• 作者: 张峰 张玉景 李立 楚东岭 陈小风
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 血管生成素1 聚合酶链式反应 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2008,（42）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 8274-8276
• 页数: 3页
• 分类号: R392
• 字数: 3149字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.42.021

摘要

背景:血管生成素1 具有抑制内皮细胞凋亡,促进血管出芽、迁徙、趋化,维持血管稳定,防止液体渗漏和减轻局部炎症等作用.应用载体携带血管生成素1基因表达血管生成素1治疗各种损伤正被广泛研究.目的:构建人血管生成素(human angiopoietin 1,hAng-1)真核表达载体pcDNA3.1+-hAngl.设计、时间及地点:单一样本观察.实验于2007-10/2008-03在唐都医院中心实验室完成.材料:人血管生成素1基因为中国医科大学马腾博士赠送;pcDNA3.1+为Invitrogen公司产品:JM109感受态细胞为TAKARA公司产品.方法:血管生成素1基因片段经巢式聚合酶链反应方法扩增,血管生成素1基因片段及载体pcDNA3.1+分别经HindⅢ和Xho Ⅰ双酶切,之后经T4连接酶连接,构成pcDNA3.1+_hAngl.主要观察指标:①酶切鉴定.②合成载体测序鉴定.结果:所构建的pcDNA3.1+.hAng1载体经HindⅢ和Xho Ⅰ酶切,TBE胶电泳可得1.5 kb的hAng1片段及5.4 kb的pcDNA3.1+片段.合成载体送北京奥科测序,结果正确,与GenBank中AY121504一致.结论:利用基因重组和双酶切构建出了pcDNA3.1+-hAng1,为进一步研究其功能和活性奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张峰	解放军第四军医大学唐都医院呼吸内科	30	76	6.0	7.0
2	张玉景	解放军第九十七医院心胸外科	8	33	4.0	5.0
3	楚东岭	解放军第四军医大学唐都医院呼吸内科	7	53	4.0	7.0