M-CSF胞质内稳定表达细胞系的构建和鉴定

• 作者: 吴海燕 唐圣松 姚志红 朱炳阳 涂剑
• 来源期刊: 南华大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 巨噬细胞集落刺激因子 靶向定位载体 HeLa细胞 胞质
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 133-135
• 页数: 3页
• 分类号: R318
• 字数: 2232字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2009.02.004

摘要

目的 构建真核细胞pCMV/cyto/myc-M-CSF载体,建立M-CSF胞质内稳定表达细胞系,为进一步研究M-CSF的胞内作用奠定基础. 方法 构建靶向定位载体pCMV/cyto/myc-M-CSF,PCR及双酶切鉴定后转染HeLa细胞,G418筛选阳性克隆,RT-PCR和免疫细胞化学鉴定M-CSF的表达及M-CSF的蛋白定位. 结果 重组质粒pCMV/cyto/myc-M-CSF用M-CSF特异性的引物进行PCR扩增,结果 显示插入片段约为1 400 bp,双酶切后分别得到约5.0 kb和1 400 bp的两条带,M-CSF分子大小与预期一致.RT-PCR、免疫细胞化学结果 表明转染M-CSF的HeLa细胞高表达M-CSF(P<0.05),并且转染M-CSF的HeLa细胞表达的M-CSF蛋白定位于细胞质. 结论 成功构建了稳定高表达胞质M-CSF的HeLa细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴海燕	南华大学药物药理研究所	14	75	5.0	8.0
3	朱炳阳	南华大学药物药理研究所	86	668	15.0	20.0
4	涂剑	南华大学药物药理研究所	41	102	5.0	8.0
5	唐圣松	南华大学药物药理研究所	65	332	11.0	16.0
8	姚志红	南华大学药物药理研究所	3	21	1.0	3.0