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全长及细胞内磷酸化位点缺失的人组织因子真核表达重组质粒的构建及其生物学功能
全长及细胞内磷酸化位点缺失的人组织因子真核表达重组质粒的构建及其生物学功能
作者:
孙立
张陆勇
施伟
林森森
袁胜涛
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
组织因子
磷酸化位点缺失
真核表达载体pcDNA3.1(+)
细胞迁移
摘要:
目的:研究组织因子(tissue factor,TF)细胞内区域的功能,分析TF细胞内区域对人乳腺癌细胞MCF-7迁移能力的影响.方法:Trizol一步法抽提人乳腺癌细胞MDA-MB-231总RNA,RT-PCR扩增TF全长(TF full-length)基因和TF细胞内磷酸化位点缺失(TF truncated)基因,分别克隆入pGEM-T载体,再构建人TF full-length基因和TF truncated基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-TF full-length和pcDNA3.1(+)-TF truncated.将构建好的pcDNA3.1(+)-TF full-length和pcDNA3.1(+)-TF truncated瞬时转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blotting鉴定重组质粒的表达,并用发色底物法检测瞬时转染后TF的促凝血功能.利用Transwell小室检测转入人TF full-length基因和TF truncated基因后MCF-7细胞的迁移能力.结果:扩增出人TF full-length基因和TF truncated基因,成功克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),并且在MCF-7细胞中表达后具有促凝血活性.瞬时转染pcDNA3.1(+)-TF truncated不能增加MCF-7细胞的迁移能力,而转染pcDNA3.1(+)-TF full-length后可以显著增强MCF-7细胞的迁移能力.结论:成功构建了带有人TF full-length,TF truncated基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-TF full-length和pcDNA3.1(+)-TF truncated,为研究TF以及其细胞内磷酸化住点区域在肿瘤学中的作用奠定了基础.
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文献信息
篇名
全长及细胞内磷酸化位点缺失的人组织因子真核表达重组质粒的构建及其生物学功能
来源期刊
中国药科大学学报
学科
生物学
关键词
组织因子
磷酸化位点缺失
真核表达载体pcDNA3.1(+)
细胞迁移
年,卷(期)
2009,(5)
所属期刊栏目
论文
研究方向
页码范围
465-470
页数
6页
分类号
Q789
字数
4487字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:1000-5048.2009.05.017
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
张陆勇
中国药科大学新药筛选中心江苏省药效研究与评价服务中心
148
1261
19.0
28.0
2
袁胜涛
中国药科大学新药筛选中心江苏省药效研究与评价服务中心
63
440
12.0
19.0
3
孙立
中国药科大学新药筛选中心江苏省药效研究与评价服务中心
41
79
5.0
7.0
4
施伟
中国药科大学新药筛选中心江苏省药效研究与评价服务中心
1
1
1.0
1.0
5
林森森
中国药科大学新药筛选中心江苏省药效研究与评价服务中心
27
77
5.0
7.0
传播情况
被引次数趋势
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引文网络
引文网络
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二级引证文献(0)
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2015(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
2016(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
研究主题发展历程
节点文献
组织因子
磷酸化位点缺失
真核表达载体pcDNA3.1(+)
细胞迁移
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国药科大学学报
主办单位:
中国药科大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1000-5048
CN:
32-1157/R
开本:
大16开
出版地:
南京市童家巷24号28信箱
邮发代号:
28-115
创刊时间:
1956
语种:
chi
出版文献量(篇)
2782
总下载数(次)
9
总被引数(次)
43758
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