丙型肝炎病毒非结构蛋白2反式激活蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 兰孟东 刘秀财 张黎颖 成军 李晓光 洪源 王琦 郝晓花
• 来源期刊: 中华传染病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 反式激活因子类 基因表达 抗体 免疫组织化学 肝炎病毒
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 217-220
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3636字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-6680.2009.04.006

摘要

目的 对HCV非结构蛋白2反式激活蛋白(NS2TP)进行原核表达,制备多克隆抗体,并探讨其在不同肝组织中的表达情况.方法 PCR法获得HCV NS2TP基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+)上,并转化入E.coli BL21.在大肠埃希菌中诱导表达,表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,经免疫印迹分析验证后,大量表达并纯化该重组蛋白.将重组蛋白免疫家兔后获取多克降抗体,应用免疫组织化学技术检测健康人及慢性HCV患者的肝组织.结果 成功获得丁重组目的 蛋白(相对分子质量为33×103)及高滴度、高特异度的多克隆抗体.慢性HCV患者肝组织内NS2TP的表达高于健康肝组织,且以细胞核内分布为主.结论 明确了慢性HCV患者肝组织内NS2TP表达量及细胞内定位的变化,为进一步研究NS2TP的生物学功能和HCV的致病机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
2	张黎颖	北京地坛医院传染病研究所	34	100	5.0	8.0
3	兰孟东	北京地坛医院病理科	30	105	7.0	9.0
4	洪源	北京地坛医院传染病研究所	44	70	5.0	6.0
5	王琦	北京地坛医院传染病研究所	29	36	3.0	4.0
6	李晓光	北京地坛医院传染病研究所	7	16	3.0	4.0
7	刘秀财	北京地坛医院传染病研究所	2	2	1.0	1.0
8	郝晓花	北京地坛医院传染病研究所	1	0	0.0	0.0