CYP3A29稳定表达HepG2细胞株的建立及其硝苯地平代谢活性鉴定

• 作者: 叶彬 商海涛 薛正楷 魏泓
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 巴马小型猪 CYP3A29同工酶 HepG2 逆转录酶PCR Western-blot 硝苯地平
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 640-644,649
• 页数: 6页
• 分类号: Q813
• 字数: 4487字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2009.07.007

摘要

目的 建立稳定表达Bama小型猪CYP3A29的HepG2细胞株.方法 通过总RNA提取、经RT-PCR得到Bama小型猪CYP3A29的基因,并将此基因克隆至亚克隆载体PMD18-T上得到重组质粒pMD-3A29;以测序正确的重组质粒pMD-3A29为模板,采用PCR扩增CYP3A29基因并在其3′添加组氨酸标签,扩增产物经 BamHI/XhoI双酶切,将带有组氨酸标签的CYP3A29基因定向克隆至pcDNA3.1(+)中,并测序验证;将测序正确的CYP3A29基因通过脂质体转染至HepG2细胞,G418筛选10代,经RT-PCR及Western-blot分析及探针药物硝苯地平对重组细胞进行活性鉴定.结果 与HepG2相比,HepG2-CYP3A29细胞株具有极显著的硝苯地平氧化活性.结论 成功建立了稳定表达CYP3A29的HepG2细胞株,可用于相关药物代谢研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	商海涛	第三军医大学实验动物学教研室	31	428	10.0	20.0
2	魏泓	第三军医大学实验动物学教研室	242	2753	27.0	38.0
3	叶彬	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	62	362	10.0	16.0
4	薛正楷	重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心	3	10	2.0	3.0