靶向HBs基因的shRNA表达载体的构建及其抑制HepG2.2.15表达HBVsAg的作用

• 作者: 唐恩洁 张国元 杨尚君 王亚平
• 来源期刊: 生物技术通报
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 小发夹结构RNA RNA干扰 乙型肝炎病毒表面抗原
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 75-78,82
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3122字
• 语种: 中文

摘要

探索用PGenesil-1(Pg)构建的靶向乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因的shRNA表达载体PGenesil-1-HBs(简称Pgs),对体外培养HepG2.2.15细胞中的HBV基因及其抗原表达的抑制作用.设计、合成靶向HBV S区的3对DNA序列,分别插入PGenesil-1中构建3个siRNA表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3,经限制性内切酶,DNA序列测定等技术鉴定确认.筛选并确定最佳细胞接种量及重组质粒转染量后,分别或按不同组合转染HepG-2.2.15细胞,48 h后采用半定量RT-PCR检测HBVsmRNA转录水平,免疫细胞化学技术检测HBsAg表达水平,MEIA分别检测细胞裂解液和培养上清中HBsAg和HBeAg的表达水平.结果表明,HBV真核表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3均能不同程度地抑制HepG2.2.15细胞中的HBsAg、HBeAg合成和HBs-mRNA转录.成功构建的HBV真核表达载体Pgs1、Pgs2、Pgs3,其中PgS3能显著抑制HBsAg表达(P＜0.01).多种表达载体联合对抗原表达的抑制作用效率不同.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王亚平	重庆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室	161	1806	23.0	36.0
2	张国元	川北医学院附属医院检验科	117	493	11.0	15.0
3	唐恩洁	川北医学院免疫与分子生物研究所	57	248	9.0	13.0
4	杨尚君	重庆医科大学基础医学院组织与胚胎学教研室	21	51	4.0	5.0