烟草蚀纹病毒外壳蛋白基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

• 作者: 吴云锋 王秀敏 韩烈保
• 来源期刊: 中国烟草学报
• 学科: 农学
• 关键词: 烟草蚀纹病毒 外壳蛋白 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 61-64
• 页数: 4页
• 分类号: S476.1
• 字数: 3519字
• 语种: 中文

摘要

利用RT-PCR方法获得烟草蚀纹病毒(TEV)外壳蛋白(CP)基因,大小为789 bp.经过Eco RI和Not Ⅰ双酶切、定向克隆到pPIC9K,构建了真核表达载体pPIC9K-TEVCP.将重组质粒用Sal Ⅰ线性化后电转化导入毕赤酵母GS115中,经PCR鉴定为阳性的菌落,利用甲醇进行诱导表达,筛选出了高效表达菌株GS115-11和GS115-14,表达的蛋白大小约为37 kD.表达产物经SDS-PAGE割胶纯化后,免疫家兔,制备了特异性抗血清,ELISA法检测效价为1:1500.Western blot结果显示,制备的抗血清可以用来检测田间的发病植株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韩烈保	北京林业大学草坪研究所	247	3694	32.0	43.0
2	王秀敏	北京林业大学草坪研究所	2	5	2.0	2.0