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摘要:
目的 分别将人类p100基因,p100 的SN基因片段和TD片段定向连入pERFP-CI质粒,使它们可与红色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达,从而为进一步研究P100蛋白及其片段的定位、功能及与其它蛋白的相互关系奠定实验基础.方法 PCR分别扩增出P100蛋白全长,SN片段和TD片段基因的序列,定向克隆至真核表达载体pERFP-CI, 构建相应的3种重组质粒.将构建成功的质粒转染入HeLa 细胞,荧光显微镜下可观察红色荧光融合蛋白表达.结果 ① PCR 法获得P100 基因序列, 长度为2 659 bp,SN基因片段1 918 bp,TD基因片段741 bp;②将重组质粒直接进行双酶切鉴定可见P100片段, 将经过蓝白斑筛选后的重组子经双酶切再与pERFP-CI载体连接并酶切得到SN片段和TD片段;③转染重组质粒后可观察到红色荧光蛋白的表达.结论 3种外源片段成功载入pERFP-CI质粒; P100全长、SN片段、TD片段均可与红色荧光蛋白在HeLa细胞中融合表达.
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质粒构建
内容分析
关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 P100蛋白及其片段重组质粒构建与表达
来源期刊 医学分子生物学杂志 学科 生物学
关键词 人类P100蛋白 重组质粒 融合蛋白 蓝白斑筛选
年,卷(期) 2009,(3) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 225-228
页数 4页 分类号 Q522.2
字数 2905字 语种 中文
DOI 10.3870/j.issn.1672-8009.2009.03.008
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 杨洁 天津医科大学免疫学教研室 56 151 7.0 10.0
2 何津岩 天津医科大学免疫学教研室 21 177 4.0 13.0
3 陆燕欣 天津医科大学免疫学教研室 2 3 1.0 1.0
4 李晓冬 2 2 1.0 1.0
5 葛林 1 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
人类P100蛋白
重组质粒
融合蛋白
蓝白斑筛选
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
医学分子生物学杂志
双月刊
1672-8009
42-1720/R
大16开
武汉市航空路13号
38-35
1978
chi
出版文献量(篇)
2127
总下载数(次)
4
总被引数(次)
8829
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:http://www.863.org.cn
项目类型:重点项目
学科类型:信息技术
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