应用实时荧光定量PCR检测外源基因拷贝数的新方法

• 作者: 万艳 李丽玲 陈小佳
• 来源期刊: 暨南大学学报(自然科学与医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 外源基因 拷贝数 实时定量PCR
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 页码范围: 310-313
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 2690字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2009.03.016

摘要

介绍一种采用实时荧光定量PCR法鉴定重组细胞株基因组中外源基因拷贝数的方法.首先根据研究对象建立标准品,以拟检测的外源基因设计特定的引物,得出标准曲线,然后在不同重组细胞株中对外源基因进行Real-Time PCR鉴定,根据结果与标准品比对得出实际的拷贝数.结果表明:以转染sPDGFRα基因的重组CHO-K1细胞为例,采用该方法,利用标准品制备的标准曲线具有较高的扩增效率和良好的线性关系,并且具有较大的线性范围(101-105拷贝);测得各重组细胞株外源基因拷贝数不同,3次独立实验表明结果一致.与传统杂交技术鉴定转基因拷贝数相比,该方法具有高效省时、更稳定、高通量和低成本等优点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈小佳	暨南大学生物工程研究所	31	287	9.0	16.0
2	李丽玲	暨南大学生物工程研究所	4	27	3.0	4.0
3	万艳	暨南大学生物工程研究所	1	13	1.0	1.0