鸡蛋主要过敏原卵类粘蛋白基因的克隆及原核载体构建与表达

• 作者: 刘志刚 吴序栎 孔小丽 邬玉兰 陈大玮
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鸡蛋 卵类粘蛋白 基因克隆 原核载体 表达
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 兽医免疫学
• 页码范围: 828-831
• 页数: 4页
• 分类号: R392.8
• 字数: 3496字
• 语种: 中文

摘要

目的:本研究利用PET表达载体克隆,表达鸡蛋主要过敏原卵类粘蛋白基因,为鸡蛋过敏疾病的特异性诊断和治疗以及进一步的实验研究奠定了一定的基础.方法:提取鸡输卵管组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增卵类粘蛋白基因(ovomucoid,OVM),并与已知序列进行同源性比较,将该片段连接入原核表达载体pET-28a,IPTG诱导表达目的蛋白.结果:成功克隆鸡蛋主要过敏原卵类粘蛋白(ovomucoid,OVM)的全长基因,该基因的开放阅读框长度为633 bp(包括终止密码子),编码210个氨基酸,与GenBank提供的OVM基因序列同源性达99%.该序列编码的蛋白为小分子量蛋白,相对分子质量约为21 kD,与理论值均相符.IPTG诱导表达后,SDS-PAGE 分析表明目的蛋白在宿主大肠杆菌BL21 (DE3) 中高效表达.结论:本研究采用体外重组的方法克隆出卵类粘蛋白基因,并实现在大肠杆菌中大量表达,这为后续鸡蛋食品基础性研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬玉兰	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	36	133	6.0	8.0
2	刘志刚	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
3	吴序栎	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	30	85	6.0	8.0
4	孔小丽	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	9	36	3.0	6.0
5	陈大玮	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	7	61	5.0	7.0