含TK-IES-ES非融合基因重组腺相关病毒的构建及其功能的初步鉴定

• 作者: 周兴 李江婷 潘建刚 陈志光 韩瑞发
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 膀胱肿瘤 腺相关病毒 自杀基因 内皮抑素
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 863-866
• 页数: 4页
• 分类号: R737.14
• 字数: 2894字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨重组腺相关病毒(rAAV)-胸苷激酶(TK)-核糖体插入位点(IRES)-内皮抑素(ES)(简称rAAV-TIE)非融合载体的构建及每个目的 基因相应生物学效应的初步鉴定.方法 (1)用PER分别扩增IRES、TK、ES序列至pMD-19T simple载体,构建pAAV-TK-IRES-ES;(2)分别采用从V-Helper Free System包装系统、"氯仿-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提"及冰乙醇沉淀法进行AAV的包装、纯化和浓缩.(3)用T24细胞及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对rAAV-TIE生物学效应进行初步鉴定.结果(1)成功构建pAAV-TIE非融合载体,并经酶切、PCR及测序证实;(2)rAAV病毒颗粒滴度达2×1010v.p/mL,浓缩后可达到2×1011-12 v.p/mL;(3)rAAV-TIE可以分泌内皮抑素,诱导T24细胞及HUVEC凋亡.结论 成功构建rAAV-TIE腺相关病毒,体外实验表明每个基因片段均能发挥相应的生物学功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周兴	广州医学院第二附属医院泌尿外科	48	124	7.0	7.0
2	陈志光	广州医学院第二附属医院泌尿外科	33	81	7.0	7.0
3	韩瑞发	天津市泌尿外科研究所天津医科大学第二医院泌尿外科	64	295	8.0	14.0
4	潘建刚	广州医学院第二附属医院泌尿外科	25	73	5.0	7.0
5	李江婷	广州医学院第二附属医院泌尿外科	10	96	6.0	9.0