人类肥胖相关新基因LYRM1真核表达载体的构建及稳定转染3T3-L1细胞系的建立

• 作者: 周晓玉 张敏 曹兴国 王玢 程锐 邱洁 郭锡熔
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肥胖症/遗传学 脂细胞/细胞学 基因表达 逆转录聚合酶链反应 克隆 分子 序列分析 DNA 遗传载体 转染 质粒
• 年，卷（期）: 2009,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 493-497
• 页数: 5页
• 分类号: R725.8
• 字数: 3754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2009.05.010

摘要

目的:构建人LYRM1基因的真核表达载体,转染3T3-L1前体脂肪细胞,建立稳定过表达人LYRM1基因的3T3-L1前体脂肪细胞系.方法:运用RT-PCR技术从人网膜脂肪组织中分离LYRM1基因的完整编码框,将其亚克隆到真核表达载体pcDNATM3.1/myc-His B,脂质体转染3T3-L1前体脂肪细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的3T3-L1前体脂肪细胞系,并利用Western blot方法鉴定其表达.结果:PCR、酶切鉴定及测序结果表明重组质粒构建正确.建立了稳定转染LYRM1的3T3-L1前体脂肪细胞,成功地表达目的基因.结论:LYRM1真核表达载体的成功构建及稳定转染3T3-L1细胞系的建立为进一步研究其功能奠定了良好的实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程锐	南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科	62	436	11.0	19.0
2	周晓玉	南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科	100	606	14.0	20.0
3	邱洁	南京医科大学附属南京儿童医院新生儿科	24	74	4.0	7.0
4	王玢	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	17	78	5.0	8.0
5	张敏	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	90	466	12.0	18.0
6	曹兴国	南京医科大学附属南京妇幼保健院儿科	4	6	2.0	2.0