绵羊肌肉抑制素C-端的表达、纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 关宏 安晓荣 李晴 舒建洪 陈永福 马毅
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 肌肉抑制素 克隆 原核表达 纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（8）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 1253-1257
• 页数: 5页
• 分类号: S852.23|S852.4
• 字数: 3809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.08.020

摘要

为深入了解绵羊myostatin基因的表达及调控机理,进行了绵羊myostatin蛋白多克隆抗体的制备.首先将绵羊myostatin基因C-端克隆人含组氨酸标签的表达载体pET-30a-c(+)中,转化大肠杆菌BL21后IPTG诱导表达,然后利用Ni2+亲和层析纯化重组蛋白,薄层扫描及Bradford法分别检测纯化后蛋白的纯度与含量.应用重组蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA法检测多克隆抗体效价,用Western blot及免疫细胞化学染色检测抗体特异性.结果,薄层扫描分析纯化后蛋白纯度可达95%以上,Bradford法检测蛋白浓度约5 mg·mL-1,制备的抗血清效价可达1:250 000以上,Western blot检测证明抗体特异性良好,免疫细胞化学染色表明抗血清可检测剑肌肉细胞中内源性myostatin的表达,说明所制备的多克隆抗体可以应用于进一步研究,有助于阐明绵羊myostatin的表达及调控机理.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马毅		2	2	1.0	1.0
5	舒建洪	浙江理工大学生命科学学院	23	23	2.0	4.0