应用AdMax系统构建携带HCV核心基因Core的重组腺病毒载体

• 作者: 周向军 李进 王战会 蒋英丽 邬冬云
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 Core基因 重组腺病毒
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 552-555
• 页数: 4页
• 分类号: Q781|Q784
• 语种: 中文

摘要

目的 应用AdMax系统构建携带丙型肝炎病毒(HCV)核心基因core的重组腺病毒载体,为进一步研究防止HCV感染的基因疫苗和基因治疗奠定基础.方法 RT-PCR法从丙型肝炎患者血清中扩增HCV Core基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构建重组穿梭质粒pDC315-Core,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒pAd-Core,经HEK293细胞扩增后,离子交换柱层析法纯化病毒,测定病毒颗粒数及滴度,并计算比活性及单细胞产量.结果 重组腺病毒pad-Core感染的HEK293细胞经PCR检测,可扩增出HCV核心基因Core片段,经测序证明,其插入序列与设计的HCV Core基因序列一致.扩增纯化后,重组腺病毒的比活性达0.034 IU/VP,单细胞产量可达2.63×104VP/细胞.结论 已成功构建重组腺病毒载体pAd-Core,为Core基因在腺病毒介导下的基因免疫和基因治疗的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王战会	南方医科大学附属南方医院感染内科	36	183	7.0	11.0
2	蒋英丽		2	6	2.0	2.0
3	周向军		3	6	2.0	2.0
4	李进		3	4	2.0	2.0
5	邬冬云	上海交通大学生命科学技术学院	1	2	1.0	1.0