登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列pcDNA3.1载体的构建

• 作者: 任丽娟 左丽 朱海东
• 来源期刊: 贵阳医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 登革热病毒 克隆细胞 序列分析 基因表达 质粒
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 357-359,365
• 页数: 4页
• 分类号: R373.33
• 字数: 2316字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2707.2009.04.001

摘要

目的: 克隆登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列,构建NS1基因部分序列的真核表达载体.方法: 用PCR技术扩增登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列,并定向克隆入pcDNA3.1(+)的kpnⅠ、xhoⅠ位点,构建真核重组载体pcDNA3.1(+)-NS1,转化Ecoli DH5a.阳性重组质粒用PCR、酶切及序列测定等方法鉴定.电穿孔法将真核重组载体转染COS-7细胞,RT-PCR鉴定其表达情况.结果: 阳性质粒经kpnⅠ及xhoⅠ双酶切及PCR获得了1个核苷酸长度为 413 bp的基因,序列测定证实与NGC株NS1基因部分基因序列有99%同源,重组真核质粒转染COS-7细胞经RT-PCR鉴定证实有表达.结论: 成功构建了含有登革2型病毒NGC株NS1基因部分序列基因的真核重组载体pcDNA3.1(+)-NS1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	左丽	贵阳医学院免疫学教研室	98	378	9.0	15.0
2	任丽娟		16	31	3.0	5.0
3	朱海东		2	3	1.0	1.0