不同诱导培养条件对重组绵羊β2-AR第二细胞外环在大肠杆菌中表达的影响

• 作者: 张慧玲 杨斌 陈勇 陈小平 韩冰
• 来源期刊: 新疆农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 β2-肾上腺素能受体 第二细胞外环 诱导表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 页码范围: 1345-1350
• 页数: 6页
• 分类号: S188|S826
• 字数: 3625字
• 语种: 中文

摘要

[目的和方法]研究对不同诱导时间、诱导剂IPTG终浓度、培养温度和振荡培养箱转速等4个诱导培养条件对绵羊β_2-肾上腺素能受体(β_2-adrenoceptor,β_2-AR)第二细胞外环重组质粒pET32C-AR/Se在大肠杆菌BL21(DE3)中表达水平的影响进行了研究,以筛选其最佳培养条件.[结果]随着IPTG诱导时间的延长,重组绵羊β2-AR第二细胞外环的相对表达量逐渐增加,在2 h时相对表达量达到最大值,为菌体总蛋白的30.1%.IPTG终浓度在0.01～2 mmol/L时,重组绵羊β_2-AR第二细胞外环的相对表达量水平均在27%～30%;当IPTG终浓度为0.01 mmol/L时,重组绵羊β_2-AR第二细胞外环的相对表达量最高,占菌体总蛋白的30.5 %.在设置的4个诱导温度中,25℃时重组绵羊β_2-AR第二细胞外环的相对表达量最高,占菌体总蛋白的35.5%.在振荡培养箱不同转速条件下,重组绵羊β_2-AR第二细胞外环的相对表达量在33%～40%波动;在200 r/min时,相对表达水平最高,为细菌总蛋白的40.0%.[结论]绵羊β_2-AR第二细胞外环基因在大肠杆菌中的表达最佳条件为:重组菌株在LB液体培养基中生长至OD_(600) 0.5左右时,加入IPTG至终浓度0.01 mmol/L,于25℃、200 r/min诱导120 min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈勇	新疆农业大学动物营养实验室	70	383	12.0	14.0
2	张慧玲	新疆农业大学动物营养实验室	13	48	5.0	6.0
3	韩冰	新疆农业大学动物营养实验室	7	16	2.0	3.0
4	陈小平	新疆农业大学动物营养实验室	2	4	1.0	2.0
5	杨斌	新疆农业大学动物营养实验室	9	55	3.0	7.0