鸡IL-18成熟蛋白基因变构体毕赤酵母表达载体的构建及表达

• 作者: 刘一尘 吴庭才 张春杰 易明林 李银聚 汪铭书 程安春 程相朝
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡IL-18 定点突变 毕赤酵母表达系统 SDS-PAGE Western-blot
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 502-506
• 页数: 5页
• 分类号: S831|S852.2
• 字数: 3906字
• 语种: 中文

摘要

为使鸡IL-18成熟蛋白基因在真核系统中高效表达,对其进行定点突变,将酵母低频密码子突变为偏嗜性密码子,构建了鸡IL-18成熟蛋白变构基因真核重组表达载体pPICZαA-MChIL18*,并将其转化入P.pastoris X-33.重组菌株X-33/pPICZαA-MChIL18*经甲醇诱导后,表达产物的上清液经SDS-PAGE检测,结果在约23 000处有目的条带,与预期的相对分子质量一致,占总蛋白的45%,对其进行Western-blot检测,结果与兔抗鸡IL-18多克隆抗体发生特异性免疫反应.结果表明,鸡IL-18成熟蛋白变构基因在毕赤酵母中成功的进行了表达.