沙门菌TanqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术研究

• 作者: 占利 朱敏 梅玲玲 汪炜 程苏云 龚璞
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光PCR 沙门菌 TaqMan-MGB探针
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 微生物检测方法
• 页码范围: 1320-1323
• 页数: 4页
• 分类号: R446.5
• 语种: 中文

摘要

目的:研究沙门菌TaqMan-MGB探针实时PCR检测,建立一种快速、准确检测沙门菌的方法.方法:以Taq-Man-MGB探针技术为基础,根据沙门菌invH基因设计引物,利用实时荧光PCR技术开展沙门菌检测.用各类菌株、食品标本及克隆到pMD18-T载体上的invH基因片段检验所建方法的特异性和敏感性.结果:应用阳参制作的标准曲线,其循环阈值与模板浓度的对数值具有很好的对应关系(r=0.997),最低检测限为7.1×10-2拷贝/μl.检测75株各类沙门菌均为阳性.检测86株志贺菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和副溶血性弧菌等非沙门菌菌株均为阴性.对2株沙门菌、1株大肠杆菌隔天连续进行6次检测,Ct值的变异系数<4%.对65份生肉类食品、30份散装熟肉制品进行实时荧光PCR检测,结果与常规方法差别无统计学意义(χ2=0.5,P>0.05).纯菌1.5 h,食品样品9.5 h即可出结果.结论:本研究所建立的沙门菌实时荧光PCR方法具有特异性强,敏感性高,简便、快速的优点,有很好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	占利		49	302	9.0	15.0
2	梅玲玲		83	735	14.0	25.0
3	朱敏		40	535	12.0	23.0
4	程苏云		72	743	14.0	24.0
5	汪炜		23	185	10.0	13.0
6	龚璞		14	69	4.0	8.0