小鼠干扰素应答基因(Ifrg15)的克隆、原核表达及其融合蛋白的亲和纯化

• 作者: 丁彪 刘一飞 张运海 李文雍
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 干扰素应答基因(Ifrg15) 基因克隆 原核表达 亲和层析
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1168-1172
• 分类号: S8
• 字数: 3647字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2010.06.021

摘要

为研究一个可能的干扰素应答基因(interferon responsive gene 15,Ifrg15)所编码蛋白质的生物学功能,对昆明小鼠(Mus musculus)基因组DNA进行PCR扩增获得Ifrg15(393 bp),并将其克隆到pGEM-T载体,经测序鉴定后用EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ酶切下Ifrgl5基因片段并和双酶切后的表达载体pET-41(c)进行连接,然后转化入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)感受态细胞.对重组克隆用IPTG诱导融合蛋白的表达,并进行分离纯化.结果表明,本实验在E.coli BL21(DE3)菌株中成功地高效表达、并在变性亲和层析条件下成功纯化了GST&6xHis-Ifrg15融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张运海	安徽农业大学动物科技学院	61	264	9.0	14.0
2	李文雍	阜阳师范学院生命科学学院胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室	29	129	6.0	10.0
3	丁彪	阜阳师范学院生命科学学院胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室	12	4	1.0	1.0
5	刘一飞	阜阳师范学院生命科学学院胚胎发育与生殖调节安徽省重点实验室	3	10	1.0	3.0