抗TNFα单链抗体在大肠杆菌中可溶性表达条件的研究

• 作者: 张建林 张悦红 杨利军 杨涛 牛勃
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 单链抗体 肿瘤坏死因子α 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 482-486,503
• 页数: 6页
• 分类号: Q76
• 语种: 中文

摘要

抗TNFα scFv在E.coli HB2151中以可溶性形式在胞周质中表达,为了进一步提高其表达量,文章通过摇瓶培养对其诱导表达条件进行了研究.将噬菌体抗体库筛选到的阳性克隆感染E.coli HB32151,分别改变诱导温度、诱导时间和诱导剂IPTG的浓度,并在培养基中加人甘氨酸和Triton X-100等添加剂,观察诱导条件的改变对scFv表达和分泌的影响.结果表明,E.coli HB32151在培养5 h对数生长期时开始诱导,在ITPG浓度为0.5 mmol/L条件下,30℃诱导20 h,胞周质中scFv的表达量比优化前增加了-倍,而且在诱导后期加入甘氨酸和Triton X-100后可增加scFv向培养基的分泌量.免疫学印迹法检测抗TNFα scFv能够与天然结构的TNFα结合,识别抗原的构象表位.该工作为其他可溶性scFv表达量的提高提供了可参考的模式.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牛勃		129	688	13.0	20.0
2	杨涛		102	335	10.0	13.0
3	张悦红		104	446	11.0	15.0
4	杨利军		48	218	7.0	13.0
5	张建林		20	86	5.0	8.0