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抗TNFα单链抗体在大肠杆菌中可溶性表达条件的研究
抗TNFα单链抗体在大肠杆菌中可溶性表达条件的研究
作者:
张建林
张悦红
杨利军
杨涛
牛勃
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
单链抗体
肿瘤坏死因子α
大肠杆菌
表达
摘要:
抗TNFα scFv在E.coli HB2151中以可溶性形式在胞周质中表达,为了进一步提高其表达量,文章通过摇瓶培养对其诱导表达条件进行了研究.将噬菌体抗体库筛选到的阳性克隆感染E.coli HB32151,分别改变诱导温度、诱导时间和诱导剂IPTG的浓度,并在培养基中加人甘氨酸和Triton X-100等添加剂,观察诱导条件的改变对scFv表达和分泌的影响.结果表明,E.coli HB32151在培养5 h对数生长期时开始诱导,在ITPG浓度为0.5 mmol/L条件下,30℃诱导20 h,胞周质中scFv的表达量比优化前增加了-倍,而且在诱导后期加入甘氨酸和Triton X-100后可增加scFv向培养基的分泌量.免疫学印迹法检测抗TNFα scFv能够与天然结构的TNFα结合,识别抗原的构象表位.该工作为其他可溶性scFv表达量的提高提供了可参考的模式.
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文献信息
篇名
抗TNFα单链抗体在大肠杆菌中可溶性表达条件的研究
来源期刊
药物生物技术
学科
生物学
关键词
单链抗体
肿瘤坏死因子α
大肠杆菌
表达
年,卷(期)
2010,(6)
所属期刊栏目
研究方向
页码范围
482-486,503
页数
6页
分类号
Q76
字数
语种
中文
DOI
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肿瘤坏死因子α
大肠杆菌
表达
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研究来源
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研究去脉
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期刊影响力
药物生物技术
主办单位:
中国药科大学
中国医药科技出版社
中国药学会
出版周期:
双月刊
ISSN:
1005-8915
CN:
32-1488/R
开本:
16开
出版地:
南京童家巷24号
邮发代号:
28-243
创刊时间:
1994
语种:
chi
出版文献量(篇)
2585
总下载数(次)
20
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
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