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摘要:
抗TNFα scFv在E.coli HB2151中以可溶性形式在胞周质中表达,为了进一步提高其表达量,文章通过摇瓶培养对其诱导表达条件进行了研究.将噬菌体抗体库筛选到的阳性克隆感染E.coli HB32151,分别改变诱导温度、诱导时间和诱导剂IPTG的浓度,并在培养基中加人甘氨酸和Triton X-100等添加剂,观察诱导条件的改变对scFv表达和分泌的影响.结果表明,E.coli HB32151在培养5 h对数生长期时开始诱导,在ITPG浓度为0.5 mmol/L条件下,30℃诱导20 h,胞周质中scFv的表达量比优化前增加了-倍,而且在诱导后期加入甘氨酸和Triton X-100后可增加scFv向培养基的分泌量.免疫学印迹法检测抗TNFα scFv能够与天然结构的TNFα结合,识别抗原的构象表位.该工作为其他可溶性scFv表达量的提高提供了可参考的模式.
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文献信息
篇名 抗TNFα单链抗体在大肠杆菌中可溶性表达条件的研究
来源期刊 药物生物技术 学科 生物学
关键词 单链抗体 肿瘤坏死因子α 大肠杆菌 表达
年,卷(期) 2010,(6) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 482-486,503
页数 6页 分类号 Q76
字数 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 牛勃 129 688 13.0 20.0
2 杨涛 102 335 10.0 13.0
3 张悦红 104 446 11.0 15.0
4 杨利军 48 218 7.0 13.0
5 张建林 20 86 5.0 8.0
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研究主题发展历程
节点文献
单链抗体
肿瘤坏死因子α
大肠杆菌
表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
药物生物技术
双月刊
1005-8915
32-1488/R
16开
南京童家巷24号
28-243
1994
chi
出版文献量(篇)
2585
总下载数(次)
20
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
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