大肠杆菌O157:H7 sRNA基因E40缺失突变株的构建

• 作者: 周围 宋兰 岳俊杰 张德礼 梁龙 王刚 马延
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 肠出血性大肠杆菌O157 H7 sRNA Red重组系统
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 175-178
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3320字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2010.02.007

摘要

目的:利用Red系统构建肠出血性大肠杆菌O157:H7的sRNA基因E40缺失突变株.方法:选取本实验室预测并经过实验验证的sRNA基因,根据NCBI上相应的序列,设计2对引物分别扩增该sRNA基因的上下游分别长464和455 bp的同源臂,经PCR扩增,构建到相应的载体,最后以构建好的含上下游同源臂和卡那零素抗性基因的长约2500 bp的线性片段作为打靶片段,在Red重组系统的作用下与sRNA基因E40的上下游同源区域发生同组,从而把sRNA基因从基因组上置换下来,之后利用质粒pCP20将FRT位点间的卡那霉素抗性基因消除.结果与结论:构建了出血性大肠杆菌O157:H7的sRNA基因E40的缺失突变株,为进一步研究sRNA基因在出血性大肠杆菌O157:H7生长及致病过程中所起的功能奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张德礼	西北农林科技大学动物医学院	14	31	3.0	5.0
2	岳俊杰	军事医学科学院生物工程研究所	26	108	6.0	9.0
3	王刚	军事医学科学院生物工程研究所	8	43	4.0	6.0
5	周围	军事医学科学院生物工程研究所	11	28	4.0	4.0
8	宋兰	军事医学科学院生物工程研究所	3	17	3.0	3.0
9	马延	军事医学科学院生物工程研究所	3	7	2.0	2.0