副溶血性弧菌VBNC的诱导及其免疫捕获PCR检测

• 作者: 孙作俤 庄旭冬 林奕华 胡忠 郭川
• 来源期刊: 中国病原生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 副溶血性弧菌 非可培养状态 免疫捕获PCR
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 页码范围: 502-504,509,封4
• 页数: 5页
• 分类号: R378.3
• 语种: 中文

摘要

目的 研究一种适用于副溶血性弧菌活的非可培养状态(VBNC)的检测方法.方法 将副溶血性弧菌VPL4-90悬浮于陈海水中,利用低温条件诱导VBNC状态,42 d后取样,进行AOAC法观察、DVC法观察、PC计数及国标法检测等;以诱导后菌体为抗原,制备兔抗VBNC血清,用于免疫捕获PCR检测.结果 进入VBNC状态的细菌缩小成球形,大部分仍然是活菌,但不能形成菌落;国标检测方法未能使进入VBNC状态的细菌得到分离培养;利用抗血清捕获VBNC菌体后对副溶血性弧菌的tlh基因进行PCR扩增,检测到副溶血性弧菌VBNC.结论 制备的抗血清对VBNC菌体具有富集作用;建立的免疫捕获PCR法可应用于对副溶血性弧菌VBNC的检测.