降解赤霉病菌毒素Tri101基因的原核表达及抗体制备

• 作者: 全鑫 孙虎 杨丽荣 段立清 薛保国 闫海霞
• 来源期刊: 植物病理学报
• 学科: 农学
• 关键词: Tri101基因 原核表达 多克隆抗体 Western blot
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 469-474
• 分类号: S432.1
• 字数: 4428字
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR方法克隆了编码禾谷镰刀菌单端孢酶烯3-O-乙酰转移酶Tri101基因的cDNA序列,并连接到原核表达载体pGEX-4T2上,将获得的重组载体pGEX4T2/Tri101转化大肠杆菌BL21后用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE和Western blot分析表明,经IPTG诱导后,Tri101基因在大肠杆菌BL21中获得了高效表达,融合蛋白GST-Tri101分子量为75.45 kDa.将该融合蛋白切胶纯化后免疫家兔,制备兔抗GST-Tri101多克隆抗体.经ELISA法测定抗体效价大于1:256 000.Western blot分析表明制备的抗体与原核细胞体外表达的Tri101蛋白可以特异性结合,表明该抗体的特异性良好.应用该抗体验证了感赤霉病小麦中Tri101基因的表达.兔抗GST-Tri101抗体的成功制备,为进一步研究Tri101的生物学功能、细胞定位以及在其它植物中的表达等奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段立清	内蒙古农业大学林学院	58	525	13.0	20.0
2	全鑫	河南省农业科学院植物保护研究所	16	134	7.0	11.0
3	薛保国	河南省农业科学院植物保护研究所	22	146	7.0	11.0
4	杨丽荣	河南省农业科学院植物保护研究所	14	108	5.0	10.0
5	孙虎	河南省农业科学院植物保护研究所	24	143	8.0	10.0
6	闫海霞	内蒙古农业大学林学院	5	22	2.0	4.0